细胞培养室入室培训

细胞培养室是相对无菌实验室，对环境要求高，为了使大家实验能够顺利进行，因此进入该实验室做实验的人员必须经过培训，并经考试合格后方可入室。现按细胞培养流程所用的仪器及设备进行培训。实验准备---细胞培养及试剂存放。

1. 硫酸缸：

1）只能浸泡玻璃器皿，在浸泡前必须用洗衣粉将玻璃器皿洗净并烤干，严禁放入塑料，橡胶等物品；捞出后自来水冲洗18遍以上，再用RO水浸泡烤干待消毒备用。

2）注意事项：注意安全，用前检查手套是否完好，发现坏手套立即扔掉，捞出时尽量沥干以免硫酸损失严重，如不慎撒到身上或底板上应立即处理。

2.消毒锅

消毒锅在504，容量大，原则上上班时间每天消毒一次（节假日不消毒），消毒时间上午9：00，消毒前在群里相互通知，尽量能一起消，消毒前向锅内加RO水至肉眼能看到水，将需要消毒的物品放进篮子放入锅内，首先检查消毒物品有无液体，如有液体，装液体的容器必须松盖，若是橡胶盖就需插针头然后用透气纸包裹，消毒模式必须选带液体的模式，以免降温时液体喷洒，如果没有液体可以直接选固体模式可以缩短消毒时间。具体操作步骤详见消毒锅旁操作步骤，使用时必须按操作步骤操作。

3.干燥烤箱

1）干燥箱是用来干燥的仪器，不是存放物品的地方，物品烤干应及时取出，烘烤温度一般是60度，可以往下调，如需高温烘烤必须告知老师，并不离人监控烘烤。

2）注意事项：开启时必须开启风机（使受热均匀，最好关机时不关风机），右边大烤箱80度以下只能用孵箱模式，放置物品时不能放置太密太整齐，要留有间隙使透气，防止局部温度过高导致燃烧。最后一个离开实验室一定关好烤箱电源。

4.超净工作台

1）超净工作台是细胞培养的必须设备，操作前用干净湿润抹布擦干净，将实验所需耗材放到台面紫外灯照射30-50分钟（严禁长时间开紫外灯照射），操作时打开风机。

2）注意事项：每个工作台配好了必须物品（试管架、酒精灯，镊子、皮头），不要随意拿出；做完实验将所产生的垃圾和废液拿出，并清洁台面；废液缸清洗干净并放回原处，关好电源。

5.二氧化碳孵箱

1）已设置好无需调试，使用过程中注意底板水盘是否有水（保持湿度），没水了加入UP水，随时注意二氧化碳气体是否用完，随时报告，关好门（锁紧内门防止漏气）。

2）保持清洁，戴消毒手套才能拿取细胞，开玻璃门前先看好自己细胞位置，拿取迅速，避免长时间开孵箱翻找，其间尽量屏住呼吸，更不能对着敞开的孵箱说话，防止污染。

3）注意事项：不小心将培养基洒漏，务必将其清洁并消毒；不要随意挪动别人的细胞。

6.冰箱

  冰箱是公用存放试剂的地方，空间有限，不能用体积较大的容器存放试剂，每位实验者需做好自己物品标记，集中放置；严禁未经允许挪用别人物品，自己物品随时清理，没用的随时取出，特别是离开实验室前必须将自己物品处理后方可退取押金。

7.显微镜

已调试好，使用过程中不要随意调试，不观察时将光线调到最暗，短时间无需关电源，每天最后离开时关电源。

8.废物丢弃

干燥废物直接放垃圾桶，培养容器先将培养液倒掉，用自来水冲洗后扔垃圾桶，严禁将培养液倒进垃圾桶，垃圾桶满后随时将口袋提出放到楼梯间垃圾桶内，并放好备用垃圾袋，固体小废物（棉球、枪头、EP管等）不要倒在水槽内。

9.注意事项：

1）实验室常规开放，周末节假日老师轮流值班。除上班时间外，中午、晚上、周末和节假日，进实验室做实验必须在实验室门口预约登记本上登记。

2）入室做实验必须佩戴好工作牌，维护实验室清洁卫生，服从老师安排，最后离开实验室时关好空调、灯、烤箱、水浴锅、门窗等。

3）如果需要用到有毒有害试剂须告知老师，实验过程中应注意安全，废弃物需特殊处理，严禁随意倒入垃圾桶和水槽。

4）以上规定如有违反，一但发现每次从该生入室押金中扣除现金50元。